ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
規(guī)格:>5×105ml
產(chǎn)品應(yīng)用:細胞實驗研究。
特點:細胞代數(shù)為4-5代左右。
細胞特征:每兩到三天進行換液。細胞應(yīng)當(dāng)在融合前傳代
冷凍保存方法:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
用途:本產(chǎn)品只提供給進一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。
ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞
細胞復(fù)蘇時如何換液呢?
1凍存細胞取出后37℃速溶,取15ml離心管,加入10ml含血清培養(yǎng)基,將凍存管中液體(通常1.5ml)也加入離心管中,習(xí)慣輕吹幾下混勻,1200轉(zhuǎn)常溫離心5min,去掉上清,加入5ml含血清培養(yǎng)基,輕吹制成細胞懸液,加入到培養(yǎng)瓶中,即可。
注意,新復(fù)蘇的細胞不要經(jīng)常去看去動。
換液的話,只要把培養(yǎng)基吸出,再加入新的培養(yǎng)基就可以了
如果你復(fù)蘇的細胞長得很不均勻,可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進去(像正常細胞一樣做)。
兩種方案可供選擇:
一、復(fù)蘇時,行離心,棄上清后,種入瓶中。主要目的是防止DMSO對細胞造成損害,但剛復(fù)蘇的細胞教脆弱,離心易導(dǎo)致細胞破碎。
二、上皮細胞復(fù)蘇時,直接將凍存管里的液體倒入培養(yǎng)瓶中,另外添加適量的培養(yǎng)基,孵箱24h,待貼壁后行常規(guī)換液。省去了離心一步,避免離心時細胞破裂。但DMSO未能去除,長時間培養(yǎng)可能會對細胞有損害。個人覺得第二種方案較方便。