HOS人骨肉瘤細(xì)胞
縮寫(xiě):HOS
種屬:Human/人
來(lái)源:ATCC
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件:89%EMEM+10%FBS+1%雙抗
規(guī)格:T25
細(xì)胞數(shù):1x10^6 cells
細(xì)胞活力:95
細(xì)胞檢測(cè):不含細(xì)菌、真菌、支原體污染。
傳代方法:1:2—1:4
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
HOS人骨肉瘤細(xì)胞
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存