SGC7901人胃癌細(xì)胞
細(xì)胞編號(hào): C6015
細(xì)胞縮寫(xiě): SGC-7901細(xì)胞
細(xì)胞名稱(chēng): SGC-7901(人胃癌細(xì)胞)
詳細(xì)背景: 1979年建系;這株細(xì)胞源自一位56歲女性胃腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。RPMI-1640培養(yǎng)12天,細(xì)胞開(kāi)始生長(zhǎng),首次傳代10天;31個(gè)月中傳代186代。免疫抑制的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功,家兔、乳犬眼前房移植成功;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,從小鼠皮下侵襲至肌層。
細(xì)胞來(lái)源: 細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系
"購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
包裝規(guī)格: 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
安全水平: 1
細(xì)胞種屬: 人
組織來(lái)源: 胃
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞特性: 貼壁
細(xì)胞融合度: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè): 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的特點(diǎn),傳代方法有3種:
(1)懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。
直接傳代法:懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁時(shí),將上清培養(yǎng)液去除1/2-2/3,然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。
(2)半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代(HeIa細(xì)胞)
此類(lèi)細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹。
打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來(lái),進(jìn)行傳代。
(3)貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
采用酶消化法傳代,常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。xy-6437R ANKRD53錨蛋白重復(fù)域53抗體
SGC7901人胃癌細(xì)胞
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存