HCC1143人乳腺導(dǎo)管癌細胞
二、使用方法
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯(lián)系。
2.如包裝完好,取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置2-3h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3.細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,棄除培養(yǎng)瓶中大部分液體,只剩5-10ml左右培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)就可以了,超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。
如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3-5Min,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4.細胞傳代
1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS 2-3ml清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1.5ml至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴1-2min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5ml,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
三、注意事項
1.在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作;
2.傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài);
3.該細胞只可用于科研。
剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,利于細胞盡快恢復(fù)狀態(tài),細胞穩(wěn)定后
再調(diào)回10%即可
收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要參考依據(jù),請您務(wù)必重視。
HCC1143人乳腺導(dǎo)管癌細胞
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。方法3. 預(yù)試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個 的稀釋比例,再正式做,效果。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。 公司產(chǎn)品經(jīng)無數(shù)次市場驗證,若出現(xiàn)質(zhì)量問題可無條件換貨或退貨。
常用免疫組織化學(xué)方法的原理:
1. 免疫熒光細胞化學(xué)技術(shù):將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量。
2. 免疫酶細胞化學(xué)技術(shù):是目前免疫組織化學(xué)研究中zui常用的技術(shù).基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進行定位或定性研究。
3. 免疫膠體金技術(shù):就是用膠體金標記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細胞內(nèi)的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究。
相關(guān)產(chǎn)品:
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Capan-2細胞株 M pancreas 胰腺 ductal_carcinoma 導(dǎo)管癌
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Cell.line.primary.name Gender Site.Primary Hist.Subtype1
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CMK-11-5細胞株 haematopoietic_and_lymphoid_tissue 血液、淋巴組織 acute_myeloid_leukaemia 急性髓性白血病
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